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阳离子聚丙烯酰胺的分子变性方法

时间:2014-09-13 点击:612 次 来源:本站
  

  絮凝剂阳离子聚丙烯酰胺厂家研究蛋白质混合物存第二维方向上的分离是按照蛋白质的相对絮凝剂分子质量的大小进行分离。絮凝剂是带电的生物大分子,在第二维方向按其相对絮凝剂阳离子聚丙烯酰胺分子质量分离时,絮凝剂阳离子聚丙烯酰胺厂家为了消除电荷的干扰,需要采用SDS对絮凝剂进行变性处理。我们在2一DE谱上所看到的是不完整的絮凝剂分子,而SDS是一种强离子絮凝剂阳离子聚丙烯酰胺去污剂,作为絮凝剂阳离子聚丙烯酰胺变性剂与助溶性试剂,可以断裂絮凝剂分子内与分子间的氢键或其他非共价键,使絮凝剂分子变性,破坏絮凝剂分子的二级结构与三级结构;同时强絮凝剂阳离子聚丙烯酰胺还原试剂巯基乙醇和二硫苏糖醇能使半胱氨酸残基之间的二硫键断裂。

在絮凝剂样品和凝胶中加入SDS和还原剂后,絮凝剂分子被解聚成它的多肽链。解聚后的氨基酸侧链与SDS充分结合形成带负电荷的蛋白质一SDS胶束,所带的电荷大大超过了絮凝剂分子原有的电荷,这就消除了不同絮凝剂分子之间原有的电荷差异。因此这种胶束在SDS-PAGE中的电泳迁移率不受絮凝剂原有电荷的影响,而主要取决于絮凝剂阳离子聚丙烯酰胺絮凝剂阳离子聚丙烯酰胺或亚基的大小。


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